|
| 新型阳离子核酸载体的细胞转染效率研究 |
| Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈａｎｏｖｅｌｃａｔｉｏｎｉｃｌｉｐｏｓｏｍｅｇｅｎｅｃａｒｒｉｅｒ：ＬＷ１３ ２ |
| |
| DOI： |
| 中文关键词: 细胞转染 核酸载体 转染效率 非病毒载体 阳离子脂质体 |
| 英文关键词: Ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄｃａｒｒｉｅｒ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ Ｎｏｎｖｉｒａｌｃａｒｒｉｅｒ Ｃａｔｉｏｎｉｃｌｉｐｏｓｏｍ |
| 基金项目: |
|
| 摘要点击次数: 1980 |
| 全文下载次数: 0 |
| 中文摘要: |
| 新型阳离子核酸载体ＬＷ１３ ２进行研究，分析其细胞毒性和基因转染效率，探讨其作为核酸载体的可能性。方法 使用ＭＴＴ比色法分析ＬＷ１３ ２与ＤＮＡ在不同比例下的细胞毒性。选用绿色荧光蛋白表达质粒ＥＧＦＰ为报告基因，以人胚胎肾ＨＥＫ２９３细胞为工具细胞，在荧光显微镜下观察计数，计算转染效率。结果 当ＬＷ１３ ２与ＤＮＡ的质量比为（１～３）∶１时，细胞毒性最低。ＬＷ１３ ２与ＤＮＡ的质量比为３∶１时，转染作用４ｈ，在无血清培养基中继续培养４８ｈ，得到ＬＷ１３ ２的最大转染效率为８７６％。结论 通过与市售成熟转染试剂Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００的对比，新型阳离子核酸载体在大幅提高基因转染效率的同时并没有增加其细胞毒性，有望成为核酸转移的有效载体，为相关研究及基因的靶向治疗研究提供基础。 |
| 英文摘要: |
| Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ ＴｏｄｅａｌｗｉｔｈｃｅｌｌｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｆｏｒＬＷ１３ ２，ａｎｅｗｃａｔｉｏｎｉｃｌｉｐｏｓｏｍｅｗｈｉｃｈｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｂｙｏｕｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｔｈｏｄｓ ＣｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＬＷ１３ ２ｗａｓｅｖａｌｕａｔｅｄｂｙ３ （４，５ ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ ２ ｙｌ） ２，５ ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ）ｃｏｌｏｒｉ ｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙＦｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｗｅｃｈｏｓｅｐＥＧＦＰｔｈａｔｃｏｕｌｄｅｘｐｒｅｓｓｔｈｅｅｎｈａｎｃｅｄｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎａｓａｒｅｐｏｒｔｅｒｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｄｉｒｅｃｔｌｙＴｈｅｎ，ＬＷ１３ ２ｃｏｍｐｌｅｘｅｓｗｅｒｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄｉｎｔｏｃｅｌｌｓａｓＨＥＫ２９３ａｎｄｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）ｗｈｉｃｈｗａｓｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｃｅｌｌｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎＴｈｅｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｗａｓｍｅａｓｕｒｅｄｂｙＦＡＣＳＲｅｓｕｌｔｓ Ｗｈｅｎｔｈｅｒａｔｉｏｗａｓ３∶１ｔｈａｔＬＷ１３ ２∶ＤＮＡ，ｗｅｇｏｔｔｈｅｌｏｗｅｓｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙＡｎｄａｆｔｅｒｔｈｅｌｉｐｏｓｏｍｅｗｉｔｈｏｕｔｓｅｒｕｍａｃｔｅｄ４ｈｏｕｒｓ，ｗｅｉｎｃｕｂａｔｅｄｔｈｅｃｅｌｌｓｆｏｒ４８ｈｏｕｒｓ，ａｎｄｇｏｔｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｇｅｎｅｄｅｌｉｖｅｒｙｏｆ８７６％Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＴｈｅｐｒｅｐａｒｅｄｎｅｗｃａｔｉｏｎｉｃｌｉｐｏｓｏｍｅｃａｎｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙｓｈａｒｐｌｙａｎｄｋｅｅｐｔｈｅｌｏｗｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙＩｔｓｈｏｗｓｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅｐｏｔｅｎｔｉａｌａｓａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｎｏｎｖｉｒａｌｃａｒｒｉｅｒｆｏｒｇｅｎｅｄｅｌｉｖｅｒｙａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓａｂａｓｉｓｆｏｒｇｅｎｅｔｈｅｒａｐ |
|
查看全文
查看/发表评论 下载PDF阅读器 |
| 关闭 |
